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鲜乳中抗生素残留检验——2008GB



录入时间:2009-4-24 15:43:19 来源:青岛海博生物

一、培养基明细:
    名称                         规格       价格(元)
营养琼脂(NA)                    250g        80
2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)       10g         135
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基        250g        75
脱脂乳                             *           *
青霉素G参照溶液                    *           *
磷酸盐缓冲液(PH7.2)  PBS          250g         80
二、备注
1、湿热链球菌抑制法:
   样品经过80℃杀菌后,添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后,嗜热链球菌开始增殖。这时候加人代谢底物2,3,5一氯化三苯四氮哇(TTC),若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,嗜热链球菌将继续增殖,还原TTC成为红色物质。相反,如果样品中含有高于检测限的抑菌剂,则嗜热链球菌受到抑制,因此指示剂TTC不还原,保持原色。
2、嗜热脂肪芽胞杆菌抑制法
    培养基预先棍合嗜热脂肪芽胞杆菌芽胞,并含有pH指示剂(澳甲酚紫)。加人样品并孵育后,若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,细菌芽胞将在培养基中生长并利用糖产酸,pH指示剂的紫色变为黄色。相反,如果样品中含有高于检测限的抗生素,则细菌芽胞不会生长,pH指示剂的颜色保持不变,仍为紫色。
3、湿热链球菌抑制法判断方法
   在白色背景前观察,试管中样品呈乳的原色时,指示乳中有抗生素存在,为阳性结果。试管中样品呈红色为阴性结果。如最终观察现象仍为可疑,建议重新检测。
4、嗜热脂肪芽胞杆菌抑制法判断方法
   在白色背景前从侧面和底部观察小试管内培养基颜色。保持培养基原有的紫色为阳性结果,培养基变成黄色或黄绿色为阴性结果,颜色处于二者之间,为可疑结果。对于可疑结果应继续培养30min再进行最终观察。如果培养基颜色仍然处于黄色一紫色之间,表示抗生素浓度接近方法的最低检出限,此时建议重新检测一次。
5、4%2,3,5一氯化三苯四氮哇(TTC)水溶液
  成分   
      2,3,5一氯化三苯四氮哩(TTC)   1g
      灭菌蒸馏水                    5mL
  制法  
    称取TTC,溶于灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于2℃一5℃保存。如果溶液变为半透明的白色或淡褐色,则不能再用。临用时用灭菌蒸馏水5倍稀释,成为4%水溶液。
6、青霉素G参照溶液
 成分 
    青霉素G钾盐      30.0mg
    无菌磷酸盐缓冲液  适量
    无抗生素的脱脂乳  适量
 制法    精密称取青霉素G钾盐标准品,溶于无菌磷酸盐缓冲液中,使其浓度为100IU/mL—1000IU/ml。再将该溶液用灭菌的无抗生素的脱脂乳稀释至0.006IU/mL,分装于无菌小试管中,密封备用。-20℃保存不超过6个月。   
   

 

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