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| 青岛高科园海博生物技术有限公司技术资料 |
| "副溶血性弧菌检验-血清学分型（GB/T 4789.7-2008） |
| 录入时间:2008-10-8 9:37:09
来源：国家卫生部 |
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1.制备：接种两管 3 ％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂试管斜面 36 ℃ 士 1 ℃ 培养 18h—24h。用含 3 ％氯化钠的 5 ％甘油溶液冲洗 3 ％氯化钠胰蛋自胨大豆琼脂斜面培养物，获得浓厚的菌悬液。
2. K抗原的鉴定：取一管上述制备好的菌悬液，首先用多价 K 抗血清进行检测，出现凝集反应时再
用单个的抗血清进行检测。用蜡笔在一张玻片上划出适当数量的间隔和一个对照间隔。在每个间隔内各滴加滴菌悬液并加一滴相当的 K 血清。在对照问隔内加一滴 3 ％氯化钠溶液。轻微倾斜玻片．使各成分相混合，再前后倾动玻片 1min。阳性凝集反应应可以立即观察到。
3．O抗原的鉴定：将另外一管的菌悬液转移到离心管内， 121 ℃ 灭菌1h。灭菌后 4000r/min 离心 15 min ，弃去上层液体，沉淀用生理盐水洗三次，每次4000r /min 离心15 min ，最后一次离心后留少许上层液体，将细胞浆弹起制成菌悬液。用蜡笔将玻片划分成相等的间隔。在每个间隔内加入一滴菌悬液，将 O 群血清分别加一滴到间隔内，最后一个间隔加一滴生理盐水作为自凝对照。轻微倾斜玻片，使各成分相混合，再前后倾动玻1min ：阳性凝集反应应可以立即观察到如果未见到与O群血清的凝集反应，将菌悬液121摄氏度再次高压后，重新检测。如果仍旧为阳性，则培养物的O抗原属于未知。根据表三报告学清学分型结果。副溶血性弧菌检验2008国家新标准（GB/T 4789.7-2008）
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