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马尿酸钠水解试验现象及注意事项

纪旭艳
录入时间:2018-5-17 14:36:58 来源:青岛海博生物

一、用途

此试验通常用于空肠弯曲菌的鉴定,也可用于军团菌、乳酸菌、B族链球菌的鉴定。

二、配方

1%马尿酸钠培养基(g/L):

 氯化钠  8.5
 磷酸氢二钠  8.98
 磷酸二氢钠  2.71
 马尿酸钠  10.0

茚三酮溶液:  

 水合茚三酮  1.75g
 丙酮  25ml
 丁醇  25ml
三、试验原理、方法及现象

原理:某些细菌具有马尿酸钠水解酶,可将马尿酸钠水解为甘氨酸和苯甲酸,甘氨酸可与茚三酮反应生成紫色化合物。

方法:挑取菌落,加到盛有0.4 mL 1%马尿酸钠的试管中制成菌悬液。混合均匀后在 36 ℃±1 ℃水浴中温育2 h 或 36 ℃±1 ℃培养箱中温育 4 h。 沿着试管壁缓缓加入 0.2 mL 茚三酮溶液,不要振荡,在 36 ℃±1 ℃的水浴或培养箱中再温育 10 min 后判读结果。若出现深紫色则为阳性;若出现淡紫色或没有颜色变化则为阴性。

左侧为空肠弯曲菌(阳性),中间为结肠弯曲菌(阴性)

备注:此试验也可用三氯化铁与苯甲酸反应生成棕褐色沉淀来判断细菌是否能够水解马尿酸钠,国标(GB4789.9-2014 空肠弯曲菌检验)中采用的是茚三酮法。

四、注意事项

1、此试验需用新鲜的菌,接种至马尿酸钠生化管时要挑取大量菌体(接种环一满环),若接种量过少则有可能出现假阴性结果。

2、配制好的茚三酮溶液在避光冷藏条件下保存不超过7天。

 

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