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硝酸盐肉汤(军团菌)生化管的使用原理及方法

杨永帅
录入时间:2018-10-22 9:48:22 来源:青岛海博生物

实验原理:

  硝酸盐培养基中的硝酸盐可被某些细菌还原为亚硝酸盐,加入对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂,可与亚硝酸盐反应,产生一种红色重氮化合物而呈阳性;硝酸盐还原的最终产物也因细菌种类不同二不同,包括亚硝酸盐、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂后不变色,再加入少许锌粉,如果变红,说明培养基中的硝酸盐未被细菌还原而仍然存在,被锌粉还原为亚硝酸盐后与对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂反应显红色,则判定为硝酸盐还原阴性;如果加入锌粉后仍然不变红,说明培养基中的硝酸盐已被还原成亚硝酸盐,进而分解成氨、氮等产物,判定为硝酸盐还原阳性。

实验方法:

1.用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用;

2.将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液;

3. 吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中,36±1℃培养24-120h后,观察试验结果。

结果判定:

质控菌株

菌株编号

生长情况

其他特征

博兹曼军团菌

ATCC33217

+++

阴性

大肠埃希氏菌

ATCC25922

+++

阳性


 

图1-1  硝酸盐肉汤(还原)质控结果

备注:a:博兹曼军团菌,b:大肠埃希氏菌,c:空白

 

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