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WORT琼脂原理和使用方法

王永兴
录入时间:2018-12-27 9:55:32 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  用于真菌(特别是酵母菌)的计数和分离培养。

  麦芽浸粉,特殊蛋白胨和糊精提供氮源,维生素,生长因子;氯化铵提供氮源;麦芽糖提供碳源;磷酸二氢钾作为缓冲剂;甘油提供能源;琼脂是凝固剂。

  操作步骤灭菌后,25℃时,该培养基pH值应为5.0±0.2

二、培养基配方(g/L):

  麦芽浸粉

15.0

  特殊蛋白胨

0.75

  麦芽糖

12.75

  糊精

2.75

  磷酸二氢钾

0.4

  氯化铵

1.0

  琼脂

17.0

  pH

5.0±0.2

三、试验方法:

  粉体装培养基的使用:

  1.称取本品49.65g,另取甘油2.35g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

  2.必须满足的试验条件:pH值为5.0±0.2

  3.制备质控菌液。

  4.选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

  5.在20-25℃培养48-72小时,记录实验结果

四、结果观察与解释 

  接种以下质控菌株,放置20-25℃需氧培养48-72小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

结果

白色念珠菌

ATCC10231

20-200

PR≥0.7

白色菌落

黑曲霉菌

ATCC16404

20-200

PR≥0.7

有黑色孢子

酵母菌

ATCC18790

20-200

PR≥0.7

白色菌落

图1-1  WORT琼脂微生物质控结果

备注:a:酵母菌,b:黑曲霉菌,c: 白色念珠菌,d:空白对照

五、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。



 

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