用途:用于金黄色葡萄球菌的显色培养,金黄色葡萄球菌显蓝绿色
金黄色葡萄球菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中金黄色葡萄球菌的快速检测,24小时内出结果。金黄色葡萄球菌显蓝绿色菌落,李斯特氏菌显紫色,绝大多数革兰氏阴性菌被抑制。
成份 (g/L)
|
营养物质 |
25.0 |
| 显色物质 |
40.3 |
| 抑菌成份 |
6.0 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品17.26g 加入200ml蒸馏水,加热完全溶解,煮沸2-3min,冷至50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
涂布法:
- 按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备样品液;
- 取1ml适宜稀释度的样品液加入表面干燥的金黄色葡萄球菌显色培养基平板中心,每个稀释度做2个平板;
3、以L形玻璃棒将样品液涂布于琼脂表面,避免涂到平板边缘,将平板正置直至样品液被培养基吸收;
4、平板倒置放入培养箱36±1℃培养18-24h,典型的金黄色葡萄球菌为凸起的蓝绿色菌落;
5、计数平板上所有凸起的蓝绿色菌落。
划线法:
- 按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备样品液;
- 取10ul-20ul样品液划线接种于已凝固好的金黄色葡萄球菌显色培养基平板上;
3、倒置放入培养箱36±1℃培养18-24h,典型的金黄色葡萄球菌为凸起的蓝绿色菌落;
注意:金黄色葡萄球菌镜检为革兰氏阳性球菌,且兔血浆凝固酶试验为阳性。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色或淡粉色。制备好的平板呈无色透明固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 24 ~ 28h 小时:
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质控菌株 |
ATCC |
生长情况 |
菌落颜色 |
不透明环 |
|
单增李氏菌 |
27853 |
+ |
紫色 |
- |
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金黄色葡萄球菌 |
25923 |
+++ |
蓝绿色 |
+ |
|
表皮葡萄球菌 |
|
+++ |
无色 |
- |
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沙门氏菌 |
14028 |
-/+ |
无色 |
- |
|
大肠杆菌 |
25922 |
-/+ |
无色 |
- |
方法的局限性
本培养基用于直接鉴定金黄色葡萄球菌,如果在 18-24 小时没有出现典型菌落,需再培养 18-24 小时。有时金黄色葡萄球菌不显灰 黑色 ,但其 外围有一不透明圈。
典型特征
典型的金黄色葡萄球菌为凸起的蓝绿色菌落。在24小时内观察结果。
参考文献
1、Beckers H. J., van Leusden F. M., Hogeboom W. M. and Delfgon-van Asch E. H. M. (1980) (English summary) De Ware(n)-Chemicals 10 . 125-130.
2、 Beckers H. J., van Leusden F. M., Bindshedler O. and Guerraz D. (1984) Can. J. Microbiol. 30. 470-474.
3、 Baird-Parker A. C. (1962) J. Appl. Bacteriol. 25. 12-19.