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培养基
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R2A琼脂培养基(中国药典)

英文名称:R2A Agar Medium
产品货号:HB0167-5
产品规格:250g
产品价格:240元
保质期:三年
产品用途:用于纯化水中菌落总数的测定
备  注:

产品介绍:

用途:用于纯化水中菌落总数的测定,(EP、USP、Chp标准)

配方:

酵母浸出粉
0.5
蛋白胨
0.5
酪蛋白水解物
0.5
葡萄糖
0.5
可溶性淀粉
0.5
磷酸氢二钾
0.3
无水硫酸镁
0.024
丙酮酸钠
0.3
琼脂
15.0
pH值7.2 ± 0.2
25℃

用法:称取本品18.18g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。

注:培养基中有少量淀粉和硫酸镁,灭菌后可能会有微量沉淀。

检验原理:酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、为可发酵糖类;可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质;丙酮酸钠可增强细菌的复苏。磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;无水硫酸镁提供二价阳离子;琼脂为凝固剂。

不同药典关于纯化水的微生物检测方法和质量标准

中国药典

    【检查】 微生物限度 取本品不少于 1ml,按薄膜过滤法处理后,采用 R2A 琼脂培养基,30~35℃培养不少于 5 天,依法检查(通则 1105),每1ml 供试品中需氧菌总数不得过 100cfu。

操作简述:

    除葡萄糖、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使加热后在 25℃的 pH值为 7.2±0.2,加入琼脂,加热溶化后,再加入葡萄糖,摇匀,分装,灭菌。 R2A 琼脂培养基适用性检查试验 照通则 1105 中“计数培养基适用性检查”的胰酪大豆胨琼脂培养基的适用性检查方法进行,试验菌株为铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌。应符合规定。

USP标准

    在美国药典中,推荐使用0.45μm薄膜过滤法,并同时使用高营养培养基(平板计数琼脂培养基(PCA))于30-35℃培养72小时以上,和低营养培养基(R2A琼脂)于20-25℃培养96小时以上。检测标准为:≤100cfu/ml 。

操作简述:(可根据实际情况调整)

    量取10ml充分混匀的水样,以无菌操作加入安装好的薄膜过滤器内,过滤。并用 pH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为100ml,共冲洗1次。过滤后,取出滤膜,正面朝上贴于琼脂平板上。共制备 2张滤膜,一张滤膜贴于平板计数琼脂培养基平板(高营养培养基)置30℃~35℃生化培养箱中倒置培养2~3天,计数。另一张滤膜贴于R2A琼脂平板(低营养培奍基),置20℃~25℃生化培养箱倒置培养5~7天,计数。以培养基平板上菌落数生长较多者作为检测结果, 按比例折算为1ml纯化水中的微生物数量后报告。
EP标准

    在欧洲药典中使用薄膜过滤法(0.45μm 孔径滤膜),使用 R2A 琼脂培养基在 30℃~35℃培养 5 天以上。 质量标准:≤100cfu/mL。

操作简述:(可根据实际情况训整)

    量取 10ml 充分混匀的水样,以无菌操作加入 安装好的薄膜过滤器内,过滤。并用 pH7.0 的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每张滤膜 每次冲洗量为 100ml,共冲洗 1 次。过滤后,取出滤膜,正面朝上贴于 R2A 琼脂平板上, 置 30℃~35℃生化培养箱中倒置培养 5 天,计数。按比例折算为 1ml 纯化水中的微生物数量后 报告。


R2A琼脂微生物质控结果:

大肠埃希氏菌  白色菌落






金黄色葡萄球菌  白色菌落

大肠埃希氏菌

白色菌落







金黄色葡萄球菌

白色菌落


铜绿假单胞菌  有绿色色素

铜绿假单胞菌

有绿色色素


R2A琼脂培养基的原理及应用:http://www.hopebiol.com/asphtml/refere9562.htm

R2A琼脂培养基(中国药典)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养48-120小时。
注:回收率计算时,用R2A琼脂做对照培养基。 


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