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霍乱双糖铁琼脂实验原理及现象

杨小洁
录入时间:2020-12-4 10:51:58 来源:青岛海博生物

一、实验原理:


 本培养基用于霍乱弧菌的生化试验(SN标准)

  

 牛肉粉、酵母粉、月示蛋白胨、蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质,乳糖、葡萄糖是可发酵的糖,氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):


成分

用量

牛肉粉

3.0

酵母粉

3.0

月示蛋白胨

15.0

蛋白胨

5.0

乳糖

5.0

葡萄糖

1.0

硫酸亚铁

0.2

氯化钠

20.0

硫代硫酸钠

0.3

琼脂

12.0

酚红

0.024

pH7.2-7.6
25℃


三、实验方法:



 称取本品 64.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装于试管内的 3/4 左右高度,121℃高压灭菌 15 分钟,放置高层斜面备用。


四、结果观察与解释

 

 按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。 

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其它特征

霍乱弧菌非01群

HB081127A-1

/

+++

K/A,H2S(-),产气(-)

副溶血性弧菌

ATCC17802

/

+++

K/A,H2S(-),产气(-)

溶藻弧菌

ATCC17749

/

+++

K/A,H2S(-),产气(-)

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

+++

A/A,H2S(-),产气(+)

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

/

+++

K/A,H2S(+),产气(+)

普通变形杆菌

ATCC13315

/

+++

K/A,H2S(+),产气(+)


  

 实验结果现象与说明:

 1.霍乱弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌

 斜面红/底层黄:发酵葡萄糖但不发酵乳糖,是不发酵乳糖的特征的菌类。

 2.大肠埃希氏菌

 斜面黄/底层黄:既发酵乳糖也发酵葡萄糖,产生大量的酸使整个培养基呈黄色,同时有产气现象。

 3.鼠伤寒沙门氏菌、普通变形杆菌

 斜面红/底层黄(部分区域黑色):发酵葡萄糖但不发酵乳糖同时产生硫化氢,是产硫化氢不发酵乳糖特征。

 硫化氢的产生:这类菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应生成黑色的硫化亚铁沉淀。


五、注意事项


 能产生硫化氢的菌应及时观察试验结果,以免生成的硫化铁形成黑色区域,遮盖斜面与底层的颜色影响判断结果。


 霍乱双糖铁琼脂(KIA)-产品详情:

 http://www.hopebiol.com/asphtml/product247.htm


 注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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