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GB4789.2菌落总数测定新旧版本比较

许英俊
录入时间:2022-11-18 16:35:57 来源:青岛海博生物

  在食品卫生检验中,《GB4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》是一个非常重要的标准,很多种类的食品检验中,菌落总数定为必检项目。此外,该标准还用于加工环境、原材料和过程中间产品的卫生监控中。

  该标准目前使用的版本为GB4789.2-2016版,新版标准于2022.06.30发布,自2022.12.30实施。本文就新旧版本的差异专门列表比较(如表1),以期为广大检验工作人员提供参考。

表1  新旧版本标准差异对比表

比较项目

2016版

2022版

设备和材料

恒温水浴箱:46℃±1℃

恒温装置:48℃±2℃

培养基和试剂

/

增加:菌落总数测试片

检验程序

操作步骤

6.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1∶100的样品匀液

6.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),在振荡器上振荡混匀,制成1∶100的样品匀液。

6.1.6及时将15mL~20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。

6.1.6及时将15mL~20mL冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃恒温

装置中保温)倾注培养皿,并转动培养皿使其混合均匀。

结果与报告

7.2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延

删除了“菌落蔓延”的报告形式。

附录A

A.2 磷酸盐缓冲液

A.2 无菌磷酸盐缓冲液

附录B

新增具体示例

  通过上表可以看出,对于检验操作人员而言,新版标准最大的改变有三点:

1、稀释度的选择

  旧版标准中规定,选“2-3个适宜稀释度的样品匀液”进行倾注;新标准中则为选“1-3个适宜稀释度的样品匀液”进行倾注。新标准这样规定,表面看来是更宽松了,可以允许检验者选择1个稀释度进行计数,但笔者认为,这一规定实际上对检验人员的要求更高了。选择计数的稀释度较多较广,比方说每个稀释度都进行计数,那么得出的每个稀释度数据之间可以相互对比一下,对检测结果有个权衡,如果只选择一个稀释度进行计数,必然要求检验人员对自己的样品非常了解,比如说有的样品中含菌量很少(少于300CFU/mL),只选最低稀释度进行计数即可,但如果含菌量较高的样品,只选一个稀释度进行计数,没有第二个稀释度数据作为参考,那么得出的检验结果很可能是有缺陷的,这种情况下,建议还是尽量多做选几个稀释度来计数。

  总之,虽然新版标准允许选用1个稀释度来计数,但考虑检验工作的严谨性,我们还是建议尽量多选几个稀释度来计数,以期得出最真实的检验结果。


2、培养基的温度

  旧版标准中,指定用“恒温水浴箱”,新版标准改成了“恒温装置”,这种表述更加宽泛,笔者理解为只要能达到“恒温”的目的就行,不拘泥于水浴箱或其它保温恒温装置。关键是培养基的温度,旧版为“及时将15mL~20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀”,而新版标准则改为“及时将15mL~20mL冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃恒温装置中保温)倾注培养皿,并转动培养皿使其混合均匀”,培养基的温度要求从具体的点(46℃)扩展到了一个范围(46℃~50℃),这样得出的结果除了人员操作造成的差异外,温度的差异是不是也会造成检测结果的不同呢?在实际工作中发现,对于有些菌46℃倾注计数的结果和48℃倾注计数的结果的确有差异,那么如果再提高到50℃,这种差异是否会更加明显?对于同一个样品,当不同的检验人员分别用46℃和50℃的培养基倾注计数,得出的数据不一致,甚至有争议时,该怎么办?这也是笔者比较疑惑的地方。


3、试验操作

  对于试验过程中的一些操作,新版标准进行了更加细化的描述,比如6.1.3中,明确描述为稀释液需要“在振荡器上振荡混匀,制成1∶100的样品匀液”,而不再沿用旧版本中“振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1∶100的样品匀液”的说法。这一描述更加规范,也更加科学,笔者非常认同,不同方式的混匀程度,的确会给检验结果带来很大差异,具体请参考:微生物盲样检测介绍及注意事项

  微生物盲样检测介绍及注意事项

  http://hopebiol.com/asphtml/refere10605.htm

  希望操作人员都能严格按照标准操作,进行混匀。

  有关菌落总数测定的要求和其它注意事项,还可参考:

  菌落总数测定的要求和注意事项

  http://hopebiol.com/asphtml/refere10437.htm


  除上述三个方面的变化之外,新标准还引入了“测试片”这种崭新的检验形式,后续会就此新产品做专题描述。


GB 4789.2-2016 菌落总数测定 -标准下载

http://hopebiol.com/biaozhun-download.asp?id=57

GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 -标准下载

http://hopebiol.com/biaozhun-download.asp?id=271


注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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