2025版GB4789.3大肠菌群检验标准更新解读

1.LST产气现象观察细节更改

  在使用LST观察产气现象时，增加了振摇试管观察产气的细节操作，这是因为有时候细菌产气不多，会溶解于液体中，倒管收集不到气体或产气不明显。对试管进行振摇操作，可以使溶解的气体溢出上浮，液体中可以观察到有细小的气泡出现一直上浮到液体表面，此现象也为产气阳性。若LST培养至48h均无产气现象，则可直接按照附录中的MPN表报告检验结果。

2.LST培养时间调整

  LST出现产气现象，需转接BGLB进行确证试验，旧标准是培养48h观察产气情况，新标准则改为了在24h进行初次观察，若产气则可停止培养判为大肠菌群阳性，若不产气则需继续培养至48h，在某些情况下缩短了检验培养的时间。

3.附录C的加入

  在进行样品检验时，某些情况下对样品的含菌量不了解，担心选择3个稀释度可能不够，无法准确得出想要的结果，因此实际操作时可能会做4-5个稀释度甚至更多的稀释度，新标准中增加了的附录C，则很好的教大家在稀释度超过3个的情况下，该如何选择进行计算。

4.新增测试片法及乳制品培养温度更改

  大肠菌群平板法中新增了可以使用测试片进行检验，同时增加了对乳制品使用30℃进行培养的补充条件，一方面是参考了国内外一些乳制品检验标准的培养条件（多数乳制品检验标准要求培养温度是30℃左右），一方面也是参与标准修订的企业单位经过大量数据验证分析表明，乳制品使用30℃培养计数结果要高于36℃培养的计数结果。另外在乳制品的实际检验中，有时候也会遇到使用平皿倾注法计数＜测试片法的检验结果，这也是由于乳制品中存在不耐热的或受损的大肠菌群，在经过平皿法46℃左右倾注过程会导致部分菌死亡，而测试片法则没有这个受热过程，从样品处理到培养基结束一直处于相对低的温度状态，因此计数结果可能遇到高于平皿计数法的情况。

5.VRBA水浴保温温度更改

  VRBA的水浴保温温度由46±2℃提高到了48±2℃，也是考虑到不同实验室的实际情况和不同琼脂的凝固点差异，提高水浴保温的温度更好的是可以减少琼脂凝固现象的出现，但实际操作时仍然需要注意，倾注时候的培养基温度不宜过高，否则有可能导致计数结果偏少。

6.典型和非典型菌落验证更改及结果报告

  在VRBA平板观察结果时，经常会遇到同时出现菌落特征明显的典型菌落和菌落偏小或晕环不明显的非典型菌落，根据实际检验结果统计，非典型菌落经过鉴定至少95%以上都不是大肠菌群，典型菌落经过鉴定是大肠菌群的概率则要高一些，因此在新标准中增加了对典型和非典型菌落分别计数和分开鉴定的操作，报告结果时增加了数字修约的说明，并增加了附录D，列举了一些例子教大家如何计算和报告计数结果。

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