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一、试验原理
用途：用于铜绿假单胞菌的选择性增菌培养。
原理：明胶胨和胰蛋白胨提供氮源；硫酸钾和氯化镁可促进绿脓菌素的产生；溴化十六烷基三甲铵用于铜绿假单胞菌的选择培养。萘啶酮酸抑制非假单胞菌的革兰氏阴性杆菌。
二、培养基配方（g/L）
|
明胶胨 |
16.0 |
|
胰蛋白胨 |
10.0 |
|
硫酸钾 |
10.0 |
|
氯化镁 |
1.4 |
|
溴化十六烷基三甲铵 |
0.2 |
|
萘啶酮酸 |
0.015 |
|
pH值7.1±0.2（25℃） |
|
三、试验方法
1、称取本品37.6 g，加热溶解于1000 mL蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15 min，备用。
2、以10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基（HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）），并做空白对照。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18 h-24 h，观察试验结果。
4、取一环增菌后的增菌液，以接种环密集划线于TSA，培养后观察增菌效果。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置36℃±1℃需氧培养18 h-24 h，试验结果如图1、图2和图3所示。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
|
铜绿假单胞菌 |
ATCC 9027 |
10-100 |
TSA |
半定量 |
生长良好 |
|
铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
10-100 |
TSA |
半定量 |
生长良好 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
半定量 |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
100-1000 |
/ |
半定量 |
抑制 |
 |
 |
|
|
铜绿假单胞菌ATCC 9027 |
铜绿假单胞菌ATCC 27853 |
|
 |
 |
 |
|
大肠埃希氏菌ATCC 25922 |
金黄色葡萄球菌ATCC 6538 |
空白对照 |
图1质控菌株菌悬液在TSA上的计数结果
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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