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食源性致病菌检测技术——免疫荧光技术



录入时间:2012-2-28 16:03:14 来源:食品伙伴网

    免疫荧光技术
    免疫荧光技术是用荧光素标记的抗体检测抗原或抗体的免疫学标记技术,又称荧光抗体技术。所用的荧光素标记抗体通称为荧光抗体,系由荧光素(常用异硫氰基荧光黄,F1TC)以化学方法与效价较高、活性较强的抗体共价结合后制备而成。免疫荧光技术在实际应用上主要有直接过和间接法。
    免疫测定法的代表技术是ELISA技术,是抗原或抗体吸附到固相载体上作为一种试剂来检测标本中有无相应的抗体或抗原的一种方法。根据反应原理,加入某种酶标记的抗体或抗原,洗涤除去未结合物,加入该酶的底物,酶催化底物生成有色产物,产物的量与标本中受检物的量有关,根据反应颜色的深浅可定量测定。EIA在微生物学领域中可用于病原的检测、抗体检测和细菌代谢产物的检测。EIA具有高度的特异性和敏感性,几乎所有可溶性的抗体抗原反应系统均可检测,最小可测值能够达到ng甚至pg水平。与放射免疫方法相比较,EIA的标记试剂较稳定,且无放射性危害;与免疫荧光技术相比,EIA敏感性高,不需特殊设备,结果观察简便。酶免疫技术发展较晚,但随着试剂的商品化以及自动化操作仪器的广泛使用,己使酶免疫技术日趋成熟,方法稳定,结果可靠,在很多领域取代了荧光技术和放射免疫测定法。

 

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