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培养基的检验与验收(八)鉴定类培养基的制备方法


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鉴定类培养基的介绍

  鉴定类培养基一般用于检验微生物一项或多项生化特性,许多分离类的培养基同时也具有鉴定效果,也被称为分离鉴别培养基。
  鉴定培养基按状态可分为液体、固体、半固体,使用时配制的方法也不相同。
配制方法
1、液体类鉴定培养基:
  按照标签说明进行称量,之后不停搅拌均匀,直至完全溶解至无颗粒状,然后用移液枪分装于试管中,包扎好后拿去灭菌。
  需要观察产气的,例如硝酸盐胨水培养基,需要在试管中放入倒管,灭菌后要进行排气;
  需厌氧的,例如甘露醇发酵培养基,可在培养基上方覆盖约3mm厚的液体石蜡。
2.半固体类培养基:
  此类培养基中通常含有少量的琼脂,称量并搅拌至无颗粒后,需先加热煮沸溶解均匀,再用移液管分装于试管中,包扎好拿去灭菌
  灭菌后摆直立,待凝固后备用
3.固体类培养基:
  此类培养基中因含有琼脂,在灭菌前也需要进行加热煮沸,配制方式一般有倒平板、摆直立、摆长斜面和高层斜面这四种方式。
  ①倒平板
  按照配制方法,将灭菌后冷却至50℃左右的完全培养基倾入无菌平皿即可,需要观察透明圈等现象的培养基,例如酪蛋白琼脂、血平板等
  倾注平板不宜过厚。
  ②摆长斜面
  对于需要观察需氧条件下的单项生化反应的培养基,如尿素酶琼脂、西蒙氏柠檬酸盐琼脂等,灭菌后一般摆成长斜面(斜面:底层≈3:2,底层也可以更短,主要起固定作用)。
  ③摆高层斜面
  对于需要同时观察有氧和缺氧部分生化反应结果的培养基,如三糖铁琼脂、克氏双糖铁琼脂等,灭菌后需摆高层斜面(斜面:底层≈2:3),注意:试管塞必须具有良好的透气性。

配制小贴士:灭菌和分装的顺序
  可完全灭菌的培养基,通常建议先加热溶解分装,再进行灭菌处理。对于灭菌后还需添加不稳定成分的培养基,则需先灭菌,冷却后加入不稳定成分,再分装至无菌器皿。
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