OA李斯特氏菌显色培养基是青岛高科技工业园海博生物技术有限公司根据GB4789.30标准生产,用于食品中单增李斯特氏菌的检验。单增李斯特氏菌菌落呈蓝色,周围有一不透明环。
成分(g/L)
基础培养基(g/L)
蛋白胨
18.0g
硫酸镁
0.5g
胰蛋白胨
6.0g
氯化钠
5.0g
酵母浸粉
10.0g
氯化锂
10.0g
丙酮酸钠
2.0g
磷酸氢二钠
2.5g
葡萄糖
2.0g
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃葡萄糖苷
0.05g
甘油磷酸镁
1.0g
琼脂
15g
pH7.2±0.2 25℃
李斯特氏菌添加剂6.0g 李斯特氏菌抑菌剂(冻干粉)1ml*5支
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果
用法:
称取基础培养基14.2g,加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动1-2min,使其混合均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15min。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为2-3mm,这样有利观察不透明环。
操作步骤:
使用前,把制备好的培养基放置室温10-20分钟。
1.按GB4789.30标准制备样品液;
2.把样品液加入Fraser增菌肉汤(FB1、FB2)中增菌;或使用PBS或Fraser增菌肉汤(无添加剂)进行稀释;
3.取一环增菌液划线或涂布法接种到李斯特氏菌显色培养基上,36±1℃培养24-48小时。
质量控制
1.外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明淡黄色培养基。
2.微生物试验
典型特征
质控菌株
ATCC
生长情况
菌落颜色
不透明环
单增李斯特氏菌
19114
+++
蓝色
+
绵羊李斯特氏菌
CICC21663
+++
蓝色
+
斯氏李斯特氏菌
CICC21671
+++
蓝色
-
金黄色葡萄球菌
25923
-
-
-
大肠埃希氏菌
25922
-
-
-
鼠伤寒沙门氏菌
14028
-
-
-
黑曲霉
16404
-
-
-
单增李斯特氏菌36℃±1℃培养24-48小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌36℃±1℃培养48小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。斯氏李斯特氏菌36℃±1℃培养24-48小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
贮存
制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置干阴暗干处,保存温度2-8℃。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1. VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
2. HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocyto- genes aus Weichkäse. Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).
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