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培养基的检验与验收(四)非选择性增菌培养基的检验与验收


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一、非选择性增菌培养基的介绍
非选择性增菌培养基常用于细菌的复苏、活化、增菌培养等,组成为常见的营养成分(如蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等)和盐类(磷酸盐、氯化钠等),一般不具有针对性,适用于多种细菌的生长,对营养成分进行补充也可用于一些特定细菌的培养,添加抗生素或其他抑菌成分也可制成选择性增菌培养基。
常见的非选择性增菌培养基有营养肉汤(NB)、胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、脑心浸液肉汤(BHI)、缓冲蛋白胨水(BPW)等。
二、培养基的出厂检验
首先,将待测培养基(本次以BHI培养基为例进行讲解),按照标签说明进行配制及灭菌。
之后选择稀释至适宜梯度的质控菌的菌悬液(含菌量应在10-100CFU/mL,一般可选择 -7梯度的稀释样液),按照GB4789.28标准,本次质控菌株为金黄色葡萄球菌。吸取1mL加入至待测培养基试管中,接种2支平行,同时使用TSA(或其他适宜培养基)进行倾注,计数接种量,吸取1ml菌液,加入空平皿中,倾入TSA,混匀,放置室温冷却,待凝固后,再倾入一层TSA,待其凝固后 , 置于标准中规定的条件下进行培养。
结果判定:接种目标菌的试管浊度值应达到2。
注:如增菌时间小于8小时,培养结束后吸取10μL菌液需用TSA倾注计数,菌数应大于100CFU。
三、培养基的验收方法
将质控菌株接种至非选择性肉汤培养基中过夜培养,稀释至10-3,也可采用其他方法制备含菌量105-107CFU/mL的菌悬液,使用1μL接种环挑取1环菌液,接种至待测培养基中,置于标准规定的条件进行培养。
结果判定:接种目标菌的试管浊度值应达到2。

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