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培养基的加热灭菌操作(以XLD 、SC为例)


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培养基在使用之前必须进行灭菌处理,通常来说使用最多的是压力蒸汽灭菌法,但对于某些培养基(xld sc 等)来说,高压条件会破坏培养基中的某些成分,因此只能采用加热灭菌的方式进行处理。
一、固体培养基的加热灭菌(以XLD培养基为例)
1.准确称取200ml培养基的量11.4g,加入到装有210ml去离子水(10ml为5%的水分损耗)的搪瓷缸中,用玻璃棒搅拌至无干粉完全溶解。
2.将搪瓷缸置于电磁炉上,一边加热,一边搅拌,当液面完全沸腾后,立即将搪瓷缸从电磁炉上拿开,算是一次煮沸操作;液面回落后,立即放回电磁炉,重复上面的步骤,总共煮沸4-6次即可。

二、液体培养基的加热灭菌(以SC培养基为例)
液体培养基的称量溶解过程都和固体加热灭菌的操作方法一样,不同的是在微波炉上加热至微微沸腾后需迅速置于冰水中降温,待其完全冷却后分装至无菌试管备用。
这是因为SC液体培养基中含有亚硒酸氢钠,过分加热会使其分解,导致培养基选择性下降,影响实验结果判断,因此只能轻微加热。
正常加热灭菌的SC培养基,为淡黄色澄清透亮的液态。过分加热灭菌的SC培养基,为红色液态,此时则不能使用。


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