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β型溶血性链球菌(一)增菌与分离


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1. 样品处理及增菌:
  按无菌操作称取检样25g(mL),加入盛有225mL mTSB的均质袋中,用拍击式均质器均质1min~2min;若样品为液态,振荡均匀即可。36℃±1℃培养18h~24h。
2.分离
  将增菌液划线接种于哥伦比亚CNA血琼脂平板,36℃±1℃厌氧培养18h~24h,观察菌落形态。(溶血性链球菌多为兼性厌氧菌,可通过厌氧培养的方式进行筛除专性需氧菌)
  溶血性链球菌在哥伦比亚CNA血琼脂平板上的典型菌落形态为直径约2mm~3mm,灰白色、半透明、光滑、表面突起、圆形、边缘整齐,并产生β型溶血。
3.鉴定
  1>分纯培养
  挑取5个(如小于5个则全选)可疑菌落分别接种哥伦比亚血琼脂平板和TSB增菌液,36℃±1℃培养18h~24h。
  2>革兰氏染色镜检
  挑取可疑菌落染色镜检。
  β型溶血性链球菌为革兰氏染色阳性,球形或卵圆形,常排列成短链状。
所需产品:
  HB0153-1 哥伦比亚CNA血琼脂
  HBPM0153 哥伦比亚CNA血琼脂平板(9cm)
  HB4114-20 改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基(mTSB)
  HBJ4114-20 含225ml改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基均质袋

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