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副溶血性弧菌检验(一)增菌及分离


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样品制备
取25g样品,加入 3%氯化钠碱性蛋白胨水 225 mL(HBJ003),拍击式均质器拍击 2 min,制备成 1:10 的样品匀液。
定性检验
可直接将制备好的样品匀液于36℃±1℃培养8h~18h。进行培养。增菌培养结束后,用接种环在距离液面以下1cm内沾取一环增菌液,于TCBS平板(HB4130)或弧菌显色培养基(HB7011-5HBPM7011-1)平板上划线分离。
定量检验
需将均质后的样品匀液进行梯度稀释后,再进行增菌培养。吸取1mL样品匀液,注入含有 9 mL 3%氯化钠碱性蛋白胨水(HB4129-1)的试管内,振摇试管混匀,制成-2梯度的样品匀液,按上述方法依次制备10倍梯度稀释样液,根据对检样污染情况的估计,选择3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种3支含有9mL3%氯化钠碱性蛋白胨水的试管,每管接种1mL。置36℃±1℃恒温箱内,增菌培养8h~18h。
培养结束后,对所有显示生长的增菌液,用接种环取一环增菌液,于TCBS 平板(HB4130)或弧菌显色培养基(HB7011-5HBPM7011-1)平板上划线分离。一支试管划线一块平板。于 36 ℃±1 ℃培养 18 h~24 h。。
典型特征
典型的副溶血性弧菌在TCBS 上呈圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似口香糖的质感,直径2mm~3mm。
纯培养
挑取3个或以上可疑菌落,划线接种3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板(HB8631),36 ℃±1 ℃培养18h~24h。

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