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产酸产气看动力实验


葡萄糖半固体培养基

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实验原理:
在样品检验过程中,通常需要通过生化试验的方法对菌株做进一步鉴定。而能否产酸、产气和有无动力通常是微生物鉴定最常用的指标,在沙门氏菌和志贺氏菌的鉴定中尤其重要。本次视频主要介绍一种能同时检验这三大指标的一款培养基―葡萄糖半固体琼脂培养基的接种方法及结果判断。

操作步骤:
1. 首先,需要准备的物品有:新鲜培养出的待测菌体单菌落、提前制备好的葡萄糖半固体琼脂试管(或成品生化管)、接种针及其它常备试验用品。
2. 接种时,直接用无菌接种针挑取待测的新鲜菌体,在培养基管中进行穿刺,然后塞上试管塞或用封口膜将生化管口封住,放于37度培养18h,观察结果。

结果判定:
a 若培养基变黄,表示待测菌产酸,记为阳性;若为紫色、紫灰色,则表示待测菌不产酸,记为阴性;

b 若管体内有气泡出现,表示待测菌培养过程中会产气,记为阳性;反之记为阴性;

c 若待测菌生长扩散至整个培养基中呈云雾状浑浊生长,记为动力阳性;若菌体只沿穿刺线生长,则记为动力阴性。

注意事项:
试验过程中,若使用高层试管,会出现上部变黄,底部仍为紫色的现象,这是因为穿刺的深度不够,试管底部没有菌体生长,结果判断时,只要上部变黄就应记为产酸阳性;若用生化管进行实验,就会看到整个生化管内的培养基都变黄了,不存在判断争议。产气和动力的判断,两者没有明显优劣。

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