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肺炎支原体的灵敏度试验方法


支原体肉汤培养基

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肺炎支原体的灵敏度试验采用支原体肉汤培养基进行培养,主要的步骤包括:实验物品准备及灭菌,添加血清,调节培养基pH,接种肺炎支原体。本视频详细讲解了实验的具体过程以及如何有效避免污染的操作方法,希望对您有所帮助。
1.培养基的配制及物品的准备:将陶瓷缸、试管使用蒸馏水冲洗干净备用,配制海博支原体肉汤培养基于陶瓷缸中溶解完全,分装试管,每管8 mL,塞上胶塞。之后将培养基、碳酸钠溶液、移液枪头包好,于121℃灭菌锅中灭菌15分钟。
2.烧试管口:灭菌结束后,待培养基冷却至室温后,对每支试管灼烧管口,将管口水分烤干,可有效防止污染,胶塞也需过火。此后操作过程中,只要试管进行了震荡操作,特别是震荡过程中有液体接触到试管口处的胶塞,均需再次烧口。
3.添加血清:向每支试管中添加2 mL的血清,震荡均匀。
4.调节pH:取三支试管使用碳酸钠调节pH至7.4~7.8,本次确定碳酸钠平均添加量为0 μL。因此无需添加碳酸钠即可进行下一步操作(注意:均使用灭菌后的碳酸钠以避免误差)。
5.接种肺炎支原体:接种肺炎支原体于培养基中混合均匀记为-1,并做梯度稀释至-9,设两支未接种的培养基为阴性对照管。使用封口膜封口,之后放置于36℃±1℃的培养箱中培养7-14天。
6.结果观察:培养第9天,灵敏度为9。

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