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芽孢染色实验


芽孢染色液

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芽孢染色实验实验原理:
芽孢壁厚,透性低,着色、脱色困难,利用着色力强的染色剂在加热条件下染色时,染料同时进入菌体和芽孢。进入菌体的染料可经水洗脱色,而进入芽孢的染料则难以透出,若再用复染液染色后,芽孢仍然保留初染剂的颜色,而菌体被染成复染液的颜色,即菌体和芽孢分别被染成红色和绿色来区分。

操作步骤:
1. 取一个载玻片,在其中央滴一滴去离子水,用接种环蘸取少量菌体于去离子水中,涂抹均匀,待干燥后,在火焰上过3次以固定;
2. 滴加3-4滴A液于已经固定的涂片上;
3. 用镊子夹住载玻片在火焰上持续加热6-8s(可续加染液以防其蒸干);
4. 加热完毕待玻片冷却后,倾去染液,水洗至不再褪色为止;
5. 用B液复染1min,水洗至流出液无色。待玻片干燥后,转移至显微镜油镜下观察。

实验结果:
枯草芽孢杆菌的芽孢呈绿色,菌体呈红色。

注意事项:
1. 只有在加热条件下芽孢渗透性发生变化,才能将其染色;
2. 第3步,持续加热6-8s要使染液冒蒸汽但不能沸腾,并且不能蒸干。

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