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李斯特氏菌的初步检测


李斯特氏菌显色培养基

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操作步骤:
1、取一环经过LB2二次增菌的样品培养液划线接种于PALCAM琼脂平板,同时划线接种于李斯特氏菌显色平板,于36℃±1℃培养24h~48h,观察各个平板上生长的菌落。
2、单增李斯特氏菌典型菌落在PALCAM琼脂平板上为小的圆形灰绿色菌落,周围有棕黑色水解圈,有些菌落会有黑色凹陷;
原理:这是因为李斯特氏菌属都能够水解七叶苷生成6,7-二羟基香豆素,该物质与培养基中的柠檬酸铁铵中的铁离子作用生产一种黑色物质,从而使培养基变黑色。
3、在海博李斯特氏菌显色平板上为蓝绿色菌落,周围有一不透明环。
说明:李斯特菌属在此培养基上都是蓝绿色菌落,但只有单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌蓝绿色菌落周围有一层晕圈。单增李斯特氏菌与绵羊李斯特氏菌可以通过后续溶血环大小得到区分。因此,李斯特氏菌显色培养基效果明显优于PALCAM等传统培养基。
4、从选择性琼脂平板上分别挑取3个~5个典型或可疑菌落,分别接种木糖、鼠李糖发酵管,于36℃±1℃培养24h±2h,同时在TSA-YE平板上划线进行纯培养,于36℃±1℃培养18h~24h。
培养后选取木糖阴性(呈蓝色或蓝绿色)、鼠李糖阳性(呈黄色)的TSA-YE平板纯培养物继续进行后续的鉴定。


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