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MR-VP实验


MR-VP培养基

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操作步骤:
1.挑取实验菌苔接种于生理盐水管中,制备菌悬液,本实验以大肠埃希氏菌、单增李斯特氏菌、产气肠杆菌为例,进行实验;
2.然后用移液枪吸取100ul菌悬液,接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中,每种菌接种2个试管;
3.之后放置于36℃培养24-48h。

MR实验:
向试管中滴加3滴甲基红试剂,观察颜色变化,接种大肠杆菌和单增李斯特氏菌的试管变红,为阳性反应;接种产气肠杆菌的试管不变红,为阴性反应。
实验原理:不同细菌分解葡萄糖的产物不同,大肠杆菌、单增李斯特氏菌可分解葡萄糖产生大量酸,使pH值下降到4.5以下,所以滴入甲基红显红色; 产气肠杆菌产酸较少,所以滴入甲基红显橙黄色。

VP实验:
另取试管,向试管中滴加V-P试剂A液(6%α-萘酚-乙醇溶液)9滴,B液(40%氢氧化钾溶液)3滴,建议最低使用量为A液6滴、B液2滴。充分振荡混匀,之后置于36±1℃培养0.5-4h。
培养结束后观察结果,发现接种大肠杆菌的试管不变红,为阴性反应;接种单增李斯特氏菌和产气肠杆菌的试管变红,为阳性反应。
实验原理:产气肠杆菌、单增李特氏菌分解葡萄糖产生丙酮酸,并使丙酮酸脱羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,在碱性溶液中被空气氧化生成二乙酰,继续与培养基中的胍基反应生成红色化合物,即为V-P阳性。


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