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副溶血性弧菌的生化鉴定


HBI副溶血性弧菌生化鉴定条

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副溶血性弧菌的生化鉴定实验步骤:
1.挑取纯培养的单菌进行革兰氏染色及氧化酶试验,副溶血性弧菌为革兰氏阴性菌,氧化酶阳性实验结果(具体实验操作详见海博官网)。
2.之后,用接种针从平板上挑取部分菌落至2 ml无菌生理盐水试管中,充分振荡,制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液。
3.取一支无污染的海博生物副溶血性弧菌生化鉴定条,用酒精棉擦拭打孔器,依次打孔,用移液枪吸取100 μl菌悬液,依次加入每个孔中。其中VP半固体需采用穿刺接种:用接种针挑取纯培养的单菌落,穿刺接种于生化管中。赖氨酸和氨基酸对照则需覆盖灭菌液体石蜡:取一支无菌液体石蜡,掰开安瓿瓶,用移液枪吸取适量液体石蜡,覆盖表层。
4.接种完后做好标记,盖上盖子,放置36℃±1℃培养24h。
结果观察:
培养结束后,在记录卡上观察实试验结果。
副溶血性弧菌应为
无盐胰胨水和10%氯化钠胰胨水阴性,不生长;6%? 8%氯化钠胰胨水呈阳性,生长;
氨基酸对照黄色;赖氨酸脱羧酶阳性,紫色;甘露醇阳性,变黄;
VP半固体:动力阳性;加入vp试剂混匀后4h内不变色,为vp阴性;
ONPG阴性,不变色。

注意事项:
V-P试验过程中,在培养结束后需加VP试剂(甲液:0.3ml,乙液:0.1ml),混匀后4 h内观察结果。


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